マトリックス支援レーザー脱離／イオン化（MALDI）

マトリックス支援レーザー脱離/イオン化（MALDI）は、質量分析で使用されるソフトイオン化技術であり、不揮発性または熱的に不安定な大きな分子を分析します。この手法により、生体分子（DNA、タンパク質、ペプチド、糖など）および大きな合成有機分子（ポリマー、デンドリマー、その他の高分子など）の識別と空間分布の研究が可能になります。

MALDIは、対象種の実質的なフラグメンテーションにつながることが多い従来のイオン化技術とは異なり、分子全体の脱着とイオン化を可能にする独自の技術です。最初に、サンプルは、α-シアノ-4-ヒドロキシ桂皮酸などの選択されたマトリックスと混合され、ターゲットプレート上に堆積されます。このプレートは、パルスレーザーからの光子によって衝撃を受け、マトリックスの脱着とイオン化をもたらします。続いて、エネルギーがマトリックスからサンプル分子に伝達されます。この穏やかなエネルギー移動プロセスにより、サンプル分子はそのまま残りますが、気相になり、プロトン化/カチオン化または脱プロトン化/アニオン化された分子イオンが生成されます。

イオンは飛行時間型質量分析計（ToF MS）で分析されます。この手法を使用して、イオンの質量は、質量/電荷（m / z）比に従って時間内にイオンを分離することによって決定されます。質量範囲全体のスキャンがToFMSで行われ、完全な質量スペクトルが得られます。 ToF MSを使用すると、イオンの分子量を高精度で測定できます。ほとんどの場合、特定の分子の質量を取得するだけでは、一意の識別には不十分です。この情報を取得するためのルートは、タンデム質量分析（MS / MSまたはToF / ToF）です。最初に、選択されたイオンが分離され、続いてフラグメント化されます。次に、親イオンとフラグメントイオンがXNUMX番目のToF質量分析計で分離され、フラグメントのパターンが生成され、目的の分子の特徴的なフィンガープリントが形成されます。

MALDIの理想的な使用法

正確な分子量測定
- サンプル識別
- サンプルの純度の決定
- アミノ酸置換の検証
- 翻訳後の修正の検証
反応モニタリング
- 酵素反応
- 化学修飾
- タンパク質消化
アミノ酸とオリゴヌクレオチドの配列決定
- アミノ酸配列の確認
- ペプチドのde novoキャラクタリゼーション
- タンパク質分解フラグメントからの配列「タグ」を用いたデータベース検索によるタンパク質の同定
- オリゴヌクレオチドの特徴付けまたは品質管理
タンパク質構造
- H / D交換により監視された蛋白質折畳み
- タンパク質 - リガンド複合体形成生理的条件
- 高分子構造決定
細菌および真菌の同定
- 細菌および真菌分離株の同定
内の化合物の空間分布生体組織または非生物学的システム

強み

迅速、高感度、高質量精度、ハイスループット

制限事項

ソフトイオン化はすべての分子には適していません。広い多分散性ポリマーの質量識別

MALDI技術仕様

取得した情報：
- 個々の成分の組成、分子量、構造情報
- 定性的および（半）定量的
サンプルタイプ： 固体または液体（水性緩衝液または溶媒に溶解）など DMFまたはDCM）
質量範囲： 50 - 100000 g / mol
質量精度：
- 質量に対する0.1％（1000 ppm）
- > 4000 g / mol
- 質量に対して0.005％（50 ppm）以上
- <4000 g / mol
- 50×10-3 MS / MSモードでg / mol
質量感度： Compound と行列依存
横方向の解像度（イメージング）： 20 x 20 ミクロン