Chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC)

La chromatographie liquide haute performance (HPLC) et la chromatographie liquide ultra haute performance (UPLC) sont des techniques analytiques qui utilisent l'affinité intrinsèque d'un composé à la fois pour une « phase mobile » (généralement un solvant tamponné) et une « phase stationnaire » (support solide poreux avec enrobage). Une pompe est utilisée pour fournir un flux continu d'un solvant dans lequel un échantillon dissous est introduit. Une fois que l'échantillon dissous est introduit, il traverse une colonne analytique contenant la phase stationnaire, et les analytes contenus dans le mélange d'échantillons dissous sont ensuite séparés, en fonction de leur affinité pour les particules enrobées dans la colonne. Une fois les composants de l'échantillon séparés, ils peuvent passer à travers un assortiment de détecteurs. La réponse du détecteur et le « temps de rétention » (temps nécessaire à un composé pour passer de l'injecteur au détecteur) du ou des composés d'intérêt peuvent alors être comparés à un matériau de référence. L'UPLC améliore la HPLC avec une résolution de pic et un débit améliorés.

EAG maintient un inventaire contenant plus de 250 colonnes couvrant la phase inverse (c'est-à-dire C8 et C18), la phase normale (c. acides organiques, etc. Nous pouvons généralement obtenir des colonnes spécialisées dans les quelques jours ouvrables suivant le lancement du projet.

En outre, un certain nombre de techniques de détection peuvent être utilisées pour analyser un type spécifique de composé.

  • Détection spectrophotométrique (UV-Vis)
  • Détection de fluorescence (FLD)
  • Détection par diffusion de lumière par évaporation (ELSD)
  • Détection par spectrométrie de masse à piège à ionisation et à ionisation d'électrospray (ESI-IT-MS)
  • Détection par spectrométrie de masse à ionisation chimique et à piège ionique sous pression atmosphérique (APCI-IT-MS)
  • Détection de l'indice de réfraction (RI)

Utilisations idéales

  • L'UV-Vis, la détection par fluorescence (FLD) et la détection par diffusion de la lumière par évaporation (ELSD) permettent la détection d'une large gamme d'analytes par rapport aux normes de référence.
  • Assurance qualité et contrôle
  • Analyse quantitative et de pureté des exemples d'analytes suivants:
    • Les acides aminés
    • Antibiotiques
    • Produits contenant des cannabinoïdes et du cannabidiol (CBD)
    • Capsaïcinoïdes
    • Colorants
    • Hydrocarbures
    • Acides nucléiques
    • Acides organiques
      • Tels que les acides acétique, oxalique, formique, malique, ascorbique, maléique, fumarique et succinique.
    • Pesticides
    • Extractibles / lixiviables de polymère
      • Bisphénol A, Irganox, Cyanox, Cyasorob et plastifiants.
    • Protéines
    • Steroids
    • Celluloses/glucides modifiés, sucres et édulcorants
      • Sucres et édulcorants tels que lactose, saccharose, glucose, sorbitol, sucralose, acésulfame de potassium, saccharine sodique et aspartame
      • Agents de viscosité et d'épaississement tels que l'hydroxypropylméthylcellulose (hypromellose, HPMC), l'hydroxypropylcellulose (HPC), la méthylcellulose
    • Crème solaire et additifs cosmétiques
      • Benzophénone
      • Octocryélène
      • Acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA)
    • Autres substances organiques et inorganiques
      • Formaldéhyde
      • Buckminsterfullerène (Buckyballs, C60)
    • Biocides / conservateurs
      • Composés du chlorure d'ammonium quaternaire (QAC)
        • Chlorure de benzalkonium (BZK)
      • butylhydroxytoluène (BHT)
      • Polyquats
      • Parabènes
      • tocophérols
      • Benzoate de sodium
  • Exemples d'exemples de matrice:
    • Produits pharmaceutiques, cosmétiques et diététiques / nutritionnels (c.-à-d. Crème, gel, pommade, shampoing, suspension buvable, suspension ophtalmique, comprimé, capsule, gélule)
    • Environnement (c.-à-d. Sol, eau, sédiments)
    • Biologique (c.-à-d. Cultures, tissus du bétail, lait, œufs, sang, urine)
    • Industriel (emballage, produits de nettoyage, produits chimiques, matières premières)
    • Aliments (c.-à-d. boissons, fruits, légumes, produits carnés, produits de boulangerie et autres sources transformées)
    • Autres surfaces (c.-à-d. Électronique)

Nos points forts

  • Sépare efficacement les molécules de structure similaire
  • Résultats quantitatifs précis et hautement reproductibles
  • Applicabilité à divers analytes
  • Haute sensibilité
  • Essais hautement reproductibles
  • UPLC: analyse plus rapide avec une résolution améliorée

Limites

  • Les composés doivent être solubles dans les solvants courants tels que l'eau, les alcools et l'acétonitrile
  • La pression de la pompe est limitée à 40 MPa (HPLC) et 100 MPa (UPLC)
  • Impossible de séparer les ions inorganiques
  • Absence de détecteur universel idéal
  • Les solvants non polaires agressifs ne sont pas compatibles avec l'instrument

Spécifications techniques

  • Volume d'injection d'échantillon : 1-100 uL
  • Température compartiment colonne : 5-110°C
  • Plage de pH: 1-12.5
  • Détection
    • UV/Vis (190-800 nm)
    • Fluorescence
    • ELSD

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